Antibiograma

4 de Febrero 2019

Siembra para antibiograma

-Objetivo: Observar la sensibilidad a ciertos antibióticos.

-Fundamento:

Se denomina antibiograma al conjunto de técnicas empleadas en el laboratorio, para determinar “ in vitro” el grado de sensibilidad de los microorganismos frente a la acción de distintos agentes antimicrobianos. El método de difusión en agar o por disco es el más recomendado. Este método consiste en depositar discos de diferentes antibióticos, sobre la superficie de una placa de Petri que contiene agar. El medio de cultivo más frecuentemente empleado es el de Müeller- Hinton, que permite el crecimiento de casi todas las bacterias.

-Material:

->Tubo estéril 10 ml

->Tubos patrón escala de Marfarland 0,5 ml

->Mechero bunsen

->Mechero

->Papel de filtro

->Asa de siembra 

->Cultivo EMB sembrado

->Discos de antiiótico

->Pinzas

->Alcohol

->Asa de digralsky

->Estufa

->Pipeta y puntas

->Agar Mueller-Hinton

-Antibióticos utilizados:

-> Amoxicilina

->Cefoxitin

->Vancomicina

->Amikacin

->Gentamicin

-Procedimiento:

       1- Llenar 5ml del tubo estértil con suero fisiológico.

2- Añadir colonias al suero fisiológico hasta igualar la escala de 0,5 Marfarland.

3- Sembrar 0,1 ml de inoculo en agar Mueller-Hinton.

4- Extendemos por toda la superficie con el asa de Drigralski.

5- Esterilizar las pinzas mojandolas en alcohol y acercándolas al mechero, coger los discos de antibiótico.

5- Depositar los discos de antibiótico por toda la placa.

7- Incubar la placa y observar los resultados.

-Resultados:

-Consideraciones de seguridad:

A la hora de esterilizar las pinzas y acercarlas al mechero no debemos soplarle para que se apaguen. Ya que cuando se consume el alcohol se apagan solas.

En casa de soplar deberíamos esterilizar otra vez de nuevo.

No apretar mucho los discos a la hora de colocarlo en la placa, ya que si ejercemos mucha fuerza podemos hincarlos en el agar.

-Observaciones:

-Conclusión:

Utilizamos la placa en la cual cultivamos para averiguar si era Escherichia coli. Buscamos los antibióticos que podría inhibirla y los colocamos. Como se puede observar todos la inhibian excepto 1.

-Bibliografía:

Fotos tomadas de clase.

http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/LabMicro/Antibiograma.html